在ELISA试剂盒中通常有3次加样步聚，即加标本，加酶联络物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质局部浓缩，散布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝聚、缩短后即可取得。ELISA试剂盒也可在板孔中参与稀释液，然后在微型轰动器上轰动1分钟以保证混和。通常说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一星期测定的需低温冰存。
可用作ELISA试剂盒测定的标本十分广泛，体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其间某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次试验不需用的有些应及时放回冰箱保存。在间接法ELISA试剂盒中可使本底加深。
本文将叙说ELISA试剂盒板式ELISA各个操作过程的留神要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与格外仪器协作应用，严峻遵从划定操作，必能得出的成果。ELISA试剂盒加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留神不可溅起，不可产愤慨泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
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