在ELISA试剂盒实验中常见原因如下:
a)可能原因:加样本及试剂量不准;孔间不一致;
解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。
重复某一样品时,加样时间尽可能与在次接近;
重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;样品稀释前应充分混匀。
b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;
解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。
c)可能原因:加错样本;
解决方法:检查记录和试剂,是否加错样本。
d)可能原因:加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;
解决方法:加样枪头不要贴壁。
e)可能原因:不同批号试剂盒中组分混用;
解决方法:不同批号试剂盒中组分不可混用。
f)可能原因:温育时间、洗板、显色时间不一致;
解决方法:检查时间是否一致。
g)可能原因:孔内污染杂物;
解决方法:离心样品,排除杂物。
h)可能原因:试剂/样品没有混匀;
解决方法:充分混匀样品和试剂。
i)可能原因:血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
解决方法:待血清标本完全凝固后做试验。
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