1、间接法，这个是检测抗体最常用也最简单的方法。操作步骤与双抗体夹心法一样，只是包被是纯化的相应抗原而不是抗体了，加入样品后洗涤，再加入的酶标记抗抗体，然后显色，颜色深浅与样品中待测抗体的浓度正相关。间接法也有一些自己的特点，一个就是酶标抗体可选择性检测抗体的亚型，可用于鉴别感染时期，如果是IGM，那么提示感染早期；另一个就是酶标抗体检测抗体特异性不高，容易产生假阳性，如果封闭不完全，可出现全板阳性，挺吓人的。临床上常用该方法检测抗HCV抗体、抗HEV抗体、抗CMV抗体、抗HSV抗体、抗沙眼衣原体抗体等等。
2、双抗原夹心法，原理和步骤与双抗体夹心一样的，用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。与间接法相比，具有优越的灵敏度和特异性，但不是很常用，因为就目前的技术条件，想得到能用于ELISA检测的纯化抗原还是有一定的难度。临床上常用于检测HIV抗体初筛，TP抗体和抗HBS抗体等，这些检测对特异性和灵敏度，准确性都要求特别高。
3、竞争法，和检测抗原设计的竞争法完全一致，临床上用的不多，以下总结了一下两个很具有代表性的：
（1）抗HBC抗体，检测方法与抗原相同，包被抗原之后，分两组，一组加入预先混匀的酶标抗体和待测样品，一组只加入酶标抗体，两组的显色之差可代表待测抗体的相对含量，需注意的是待测抗体与酶标抗体是同一物质。
（2）抗HBe抗体检测，方法与抗原竞争法设计稍有区别，包被的抗HBE抗体后，检测也分两组，一组先加入酶标HBeAGg再立即加入待测样品，一组只加酶标HBEAG，两组显色之差代表待测抗体的相对含量，这种设计中包被抗体和待测抗体是同一物质。值得注意的是混合组不是事先混匀再加入，而是先加入待测抗体后再加入酶标抗原。
4、捕获法，这种方法比较少用，由于具有识别抗体类型的优点，仅用于需要早期诊断的急性感染或者具有爆发性感染的疾病，如HAV-IgM、HBc-IgM、ToRCH等等。具体方法是先包被能识别抗体类别的抗体，洗涤后加样品，再洗涤，加酶标记抗原，洗涤后显色。
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